液相色譜儀分析樣品的種類繁多、物理形態(tài)廣泛、組成及其濃度復(fù)雜多變，對(duì)分析結(jié)果的干擾因素很多，為達(dá)到分析目的，樣品要進(jìn)行有效的制備。液相色譜儀分析樣品的制備包括預(yù)處理、提取、凈化和濃縮等過(guò)程。

 

液相色譜儀的基本工作原理

液相色譜儀是由溶液貯器、高壓泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜分離柱、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)幾部分組成。高壓泵從溶液貯器中抽走流動(dòng)相，流經(jīng)整個(gè)儀器系統(tǒng)，形成密閉的液體流路。樣品通過(guò)進(jìn)樣系統(tǒng)注入色譜分離柱，在柱內(nèi)進(jìn)行分離。柱流出液進(jìn)入檢測(cè)器，使已被分離的組分逐一被檢測(cè)器收集，并將響應(yīng)值轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)后經(jīng)放大被數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜峰，通過(guò)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對(duì)記錄的峰值進(jìn)行存儲(chǔ)和計(jì)算。

 

液相色譜儀是依靠色譜柱進(jìn)行分離的。研究證明：物質(zhì)的色譜過(guò)程是指物質(zhì)分子在相對(duì)運(yùn)動(dòng)的兩相（液相和固相）中分配“平衡”的過(guò)程。液相色譜儀是以具有吸附性質(zhì)的硅膠顆粒為固定相，各種洗脫液為流動(dòng)相。當(dāng)液體樣品在載體流動(dòng)相的推動(dòng)下，在液-固兩相間作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，由于各組分在兩相中的分配系數(shù)（K）不同，則使各自的移動(dòng)速度不同，即產(chǎn)生差速遷移。各組分在兩相間經(jīng)過(guò)多次分配，從而達(dá)到使混合物分離的目的。  

上式反映了物質(zhì)在兩相中進(jìn)行吸附、解吸、再吸附、再解吸…過(guò)程中，由于在兩相中濃度的不同，而存在分配系數(shù)上的差異。  

既然分配系數(shù)及其差異是引起組分在液相色譜柱分離的根本原因，必然也會(huì)同色譜理論中可測(cè)宏觀量之間存在著某種定量關(guān)系，事實(shí)上，色譜理論中通常用容量因子k’的概念來(lái)反映物質(zhì)在兩相中的分配關(guān)系k’值可以非常方便地表達(dá)組分在兩相的分配，又很容易從色譜實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中直接測(cè)得，是色譜理論中重要的基本參數(shù)之一。