中低壓液相色譜柱系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入中低壓液相色譜柱內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)中低壓液相色譜柱主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
中低壓液相色譜柱的保護(hù):
1、流動(dòng)相和樣液都需用0.45um孔徑的濾膜過(guò)濾。
2、加3~5cm保護(hù)柱。
3、進(jìn)樣閥進(jìn)樣。
4、用純甲醇保存色譜柱,防止細(xì)菌生長(zhǎng)。
5、防止過(guò)酸或過(guò)堿。
6、防止振動(dòng)和逆向流動(dòng)。
7、對(duì)硅膠基鍵合相,水溶液流動(dòng)相的ph值不得超出2~8.5的范圍,使用溫度不宜過(guò)高。
8、中低壓液相色譜柱在酸性或堿性條件下使用后,應(yīng)依次用水和甲醇清洗。對(duì)暫時(shí)不用而需要較長(zhǎng)時(shí)間保存的色譜柱,要用純甲醇清洗。
9、中低壓液相色譜柱兩端用金屬螺帽封閉,保存在干凈的有機(jī)溶劑中。
中低壓液相色譜柱的再生:
一般情況下,硅膠和ods等化學(xué)鍵合固定相再生是困難的。有時(shí)采用下述方法可能提高柱效。
1、由于雜質(zhì)微粒等因素,使色譜柱上端固定相變色,柱效下降。這時(shí),可仔細(xì)地將變色部分除去約3mm左右,再補(bǔ)充新的固定相。
2、當(dāng)色譜柱吸附未被洗脫的成分時(shí),柱效將明顯下降,可選擇合適的溶劑洗凈。
3、當(dāng)采用梯度洗脫時(shí),色譜柱在重復(fù)使用前,用泵把幾倍于柱體積的起始溶劑壓經(jīng)色譜柱,以重新建立起始的平衡來(lái)得到再生。